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Es la Biblioteca más importante de la República Argentina.

Fue creada por decreto de la Primera Junta (de los primeros gobiernos patrióticos) en 1810. Inicialmente se ubicaba en la manzana que hoy se conoce como Manzanas de las luces, ubicada en Moreno y Perú. Así se llamaba debido a las luces que se veían desde fuera, que pertenecían a los estudiantes que leían por la noche, aludiendo a su vez a un juego de palabras vinculado a la luminosidad de pensamiento.

Es curioso que, inicialmente, se construyó a base de donaciones, muchas veces de particulares.
Hoy la Biblioteca cuenta con una Biblioteca de Voces, el Fondo Bibliográfico del Tesoro (donde se guardan una gran cantidad de material bibliográfico de suma importancia histórica y cultural), una Sala de Mapoteca y Materiales Especiales y la Sala de Lectura para no videntes "Paul Groussac".
Posee a su vez 21 incunables, que son textos elaborados por imprenta confeccionados antes de los comienzos del siglo XVI. Entre ellos, si bien son todos de altísimo valor, se destacan una hoja de la célebre primer Biblia que imprimió Gutenberg entre 1455 y 1460 y una impresión de La Divina Comedia de Dante de 1487.